PCR是在试管中进行的 DNA复制反应,基本原理是依据细胞内 DNA半保留复制的机理,以及体外 DNA 分子与不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以 促使双链DNA变。PCR的技术原理是什么？更多详情请大家跟着小编一起来看看吧！
PCR的技术原理是什么(1)
PCR是在试管中进行的 DNA复制反应,基本原理是依据细胞内 DNA半保留复制的机理,以
及体外 DNA 分子与不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以 促使双链DNA变成单链,单链 DNA与人工合成的引物退火,然后耐热 DNA聚合酶以dNTP为原料使引
物沿着单链模板延伸为双链 DNAo PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行
DNA 模板解链、引物与模板 DNA 结合、 DNA 聚合酶催化新生 DNA 的合成,即高温变性、低温退火、中 温延伸3个步骤构成 PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的 DNA得以迅速扩增。
PCR的技术原理是什么(2)
类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性→退火→延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：7a686964616fe78988e69d8331333366303738模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备。
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。
重复循环变性→退火→延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。